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NanoDrop 2000分光光度计噪声也是仪器的一个重要指标
点击次数:340 发布时间:2018-12-25
   1.复色光对比耳定律的偏离
 
  NanoDrop 2000分光光度计比耳定律成立的前提条件是人射光是单色光,但是精度再高的仪器,即使是双单色器的分光光度计,也只能获得近乎单色的光,无法获得纯单色光,它仍然含有狭窄光通带,具有复色光的性质。而复色光会导致比耳定律的正或负偏离。
 
  固定狭缝的紫外分光光度计光谱带宽一般为1nm或2nm,可调狭缝的可以做到0.1nm;可见分光光度计带宽6nm、snm,甚至十几纳米。
 
  光谱带宽应该是越小越好,但是,随着光谱分辨率的提高,仪器的灵敏度降低,所以,选择仪器时要综合考虑各种条件的影响。当溶液浓度较小且单色光较纯时,可近似认为符合比耳定律。
 
  2.杂散光的影响
 
  杂散光是指进人检测器的处于待测波长光谱带宽范围外的其他波长组分,它是光谱测量中误差的主要来源。
 
  NanoDrop 2000分光光度计产生原因有:
 
  分光光度计的色散元件、反射镜、透镜及单色器内壁灰尘等。在分光光度计工作波段边缘波长处,由于单色器透光率、光源辐射强度、检测器灵敏度都较低,杂散光的影响更为显著。
 
  杂散光限制仪器的分析上限可引起严重的测量误差,实际工作中,在定量分析时,一般在吸收峰或其附近处测量样品吸光度,如果在分析波长处含有杂散光,这时样品的透光率较小,而杂散光大部分透过,使测量吸光度低于真实吸光度。
 
  3.仪器噪声对测t的影响
 
  NanoDrop 2000分光光度计噪声也是仪器的一个重要指标,它表征仪器做稀溶液的能力。是叠加在待测量的分析信号中的不需要的信号,扫描100%T和0%T线,可观察到分光光度计的噪声水平,如果仪器噪声较大,会掩盖较小的测量信号,一般用噪音的二倍来表示仪器的灵敏度。
 
  4.波长和吸光度准确度
 
  样品的每一个值都是在一定的波长下测得的,如果,波长误差很大,测出的值肯定不准。吸光度准确度也是用户对仪器的直接要求,更应引起足够的重视。
 
  国家计量检定规程规定NanoDrop 2000分光光度计透射比准确度为A级士0.6%, B级土1.0%。
 
  NanoDrop one分光光度计作为一种精密仪器,在运行工作过程中由于工作环境,操作方法等种种原因,其技术状况必然会发生某些变化,可能影响设备的性能,甚至诱发设备故障及事故。因此,分析工作者必须了解分光光度计的基本原理和使用说明,并能及时发现和排除这些隐患,对已产生的故障及时维修才能保证仪器设备的正常运行。
 
  1、若大幅度改变测试波长,需稍等片刻,等灯热平衡后,重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。
 
  2、指针式仪器在未接通电源时,电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况,需进行机械调零。
 
  3、比色皿使用完毕后,请立即用蒸馏水冲洗干净,并用干净柔软的纱布将水迹擦去,以防止表面光洁度被破坏,影响比色皿的透光率。
 
  4、操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯,以免影响光效率。
 
  5、NanoDrop one分光光度计,由于其光电接收装置为光电倍增管,它本身的特点是放大倍数大,因而可以用于检测微弱光电信号,而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移,灵敏度下降。针对其上述特点,在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下,因此在预热时,应打开比色皿盖或使用挡光杆,避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。
 
  6、放大器灵敏度换挡后,必须重新调零。
 
  7、比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用,否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下;分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液,把1600便携式分光光度计置于某一波长处,石英比色杯;220nm、700nm装蒸馏水,玻璃比色杯:700nm处装蒸馏水,将某一个池的透射比值调至100%,测量其他各池的透射比值,记录其示值之差及通光方向,如透射比之差在±0.5%的范围内则可以配套使用,若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。
 
  NanoDrop 2000分光光度计是有哪几个部分组成的?
 
  紫外可见分光光度计是有哪几个部分组成的?是很多朋友们想要知道的,业内相关专家介绍,这种设备往往是有光学系统、电光系统、光电系统、电子系统、数据处理系统和输出打印系统等部分组成。
 
  光学系统:紫外可见分光光度计这种部分系统又包括外光路系统和单色器两个主要部分,其中外光路和单色器各有很多类型,单色器就是这种设备用于散光的主要来源,也是整机在使用时候主要分析误差的来源之一。
 
  电光系统:这种部分又包括钨灯和相应的电源组成,在该设备中对整体的稳定性会有很大影响的,这种设备也是仪器不稳定的主要原因之一。
 
  光电系统:这种部分就是能够将光信号变为电信号的关键部件,不但会直接影响到仪器的灵敏度和适用范围,而且也有光电管、光电倍增管、硅光电池和二级管阵列等。
 
  电子系统:这种部分主要有放大器、A/D变换器等组成,其中放大器就是影响整机灵敏度和稳定性的主要部件,当然了这种部件还是噪声的主要来源,会直接影响到紫外可见分光光度计设备的分析误差。
 
  NanoDrop 2000分光光度计原理 :
 
  分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。
 
  根据Lambert-Beer定律:A=εbc,(A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,为液池厚度,c为溶液浓度)可以对溶液进行定量分析。
 
  你可以用紫外NanoDrop 2000分光光度计测定定三种农药的波长在某溶液中的大、小吸收波长。
 
  配制溶液-在光谱检测项下进行-调整检测光谱范围及速度--扫描光谱图--吸光度大处对应波长为吸收波长,吸光度小处对应的波长为小吸收波长。
 
  NanoDrop 2000分光光度计种类繁多,但不外乎简易型、中档型和型三大类。我们在选用分光光度计时需要考虑以下几个方面:
 
  1.波长检测范围,波长选择方式:越的仪器波长检测范围越宽,当然价格也较高,用户需要根据自己的需求选择合适的波长范围;对于简单型的仪器,波长选择方式一般是手动查找,这种方式的重复性较差,型的仪器中波长可以按照设定模式自动查找或扫描,其次型的波长扫描速度的档位也会增加。
 
  2.光束:光束类型分为单光束型,双光束型或准双光束型。单光束一般适于在给定波长处测量吸光度,不能作全波段光谱扫描,并且要求光源和检测器具有很高的稳定性;双光束可以自动记录,快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响,特别适合于结构分析;假双光束也就是比例双光束,优点是可以监测光源变化带来的误差,它的原理是由同一单色器发出的光被分成两束,一束直接到达检测器,另一束通过样品后到达另一个检测器。但是这种方式并不能消除参比造成的影响。
 
  3.光源:可见光区主要用钨灯,卤钨(320~2500nm);紫外区主要用氢灯,氘灯(180~375nm);氙灯在紫外和可见光区均可用作光源。
 
  4.样品支架:简单的样品支架为推拉式四联池架,一次只能测量一个样品,参比和样品分两次测量;型的样品池支架为两个固定式,分别是样品通道和参比通道,可以同时测量参比和样品的吸光值。
 
  5.狭缝:简易型的狭缝一般是固定宽度模式,狭缝宽度多数为2nm,也有1.5nm的;型的仪器狭缝均为连续可调型,可以适应高分辨率的需要。
 
  6.光学性能指标:光学性能的高低直接影响到测量的准确性,其中光栅的技术指标尤为重要。型仪器的光栅质量较好,一般的光栅为凹面型,并且大尺寸的凹面光栅对应的刻槽数越多,因此在分辨率和杂散光方面指标要优于简易型仪器。
 
  7.检测器:检测器是利用光电效应,将透过溶液的光信号转换为电信号,并将电信号放大的装置。简易型仪器一般采用光敏二极管;中档型仪器采用硅光二极管;型仪器的检测器使用高灵敏度的光电倍增管和红外检测器。
 
  8.显示器:简易型仪器多为机械表头或数码管显示器,没有数据处理器;型仪器的显示器为液晶式或连接电脑,数据处理可由仪器自身具有的或外接计算机处理。
 
  9.测量模式:NanoDrop 2000分光光度计多为定点(固定波长)吸光度或透过率测量方式,基本不能进行波长扫描测量;型仪器的测量模式较多,可以显示透过率、吸光度、浓度直接读数、单光束,单点及扫描均可。
 
  10.测量附件:衡量仪器质量高低的重要方面是看仪器是否具有丰富的附属测量器件,如偏振附件、积分球附件、反射附件、自动进样器附件、色度分析软件、薄膜附件。
 
  11.测量样品的状态:可见和NanoDrop 2000分光光度计一般测量液态样品,红外分光光度计一般能分析各种状态(气、液、固)的试样。
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